引言：分枝杆菌属（ Mycobacterium）是一类细长略弯曲的杆菌，因有分枝生长的趋势而得名。细胞壁含有大量脂质，主要是分枝菌酸，一般不易着色，若经加温或延长染色时间而着色后能抵抗强脱色剂盐酸乙醇的脱色，故又称抗酸杆菌，且不易破壁。本次实验ATS破壁机将样品做两部分处理，对比破壁结果。

实验对象 
胞内分枝杆菌

实验仪器
高速离心机
ATS破壁机
显微镜

实验背景
分枝杆菌属（ Mycobacterium）是一类细长略弯曲的杆菌，因有分枝生长的趋势而得名。本菌属的显著特性为：①细胞壁含有大量脂质；②无鞭毛、无芽胞，也不产生内、外毒素；③对人致病的主要有结核分枝杆菌、牛分枝杆菌、麻风分枝杆菌；④所致感染多为慢性过程，长期迁延并有破坏性的组织病变。

实验难点
细胞壁含有大量脂质，主要是分枝菌酸，一般不易着色，若经加温或延长染色时间而着色后能抵抗强脱色剂盐酸乙醇的脱色，故又称抗酸杆菌， 且不易破壁 。

实验目的
将胞内分枝杆菌进行破壁，后续提取蛋白。

实验工艺
1.预处理：将灭活后的胞内分枝杆菌液体（非结核)分为两部分，一部分不作处理；一部分做碱处理，离心后去上清加水再重悬。
2.实验工艺：ATS破壁机搭配一级模块后，控低温处理。

实验结果
A.未处理的菌液破壁结果
通过对菌液进行抗酸染色后观察，破壁前菌液呈紫色，在破壁次数相同的条件下，随着压力的增高，胞内分枝杆菌颜色偏向蓝色。
 

         美国SONICS超声波 细胞破碎仪设计旨在较大程度上保证操作人员的安全，但是设计不能防止不正确使用造成的人身伤害或者财产损坏。为了保证操作人员的人身安全和设备完好使用，必须时刻遵守以下所述的注意事项:

       美国Sonics超声波细胞破碎仪是适用于多种研究领域，多用途功能的超声波破碎仪，可处理由几百微升到多达几百升的有机和无机样品，能够破碎各类细胞、细菌、孢子、组织，又可以打碎聚合物，乳化样品，溶解难溶物质，加速化学、生物学、物理学的反应速度，雾化液体，分散颗粒，制备样品，汽化液体等。

生物工艺过程流程图         如图所述，细胞破碎是分离纯化的关键第一步， 经过发酵得到细胞后，由于目的产物都在细胞的内部，需用通过高压细胞破碎仪，将细胞破碎开，把胞内产物释放出来，后续的分离纯化才好进行。

Millipore试剂盒推荐使用Q800R3设备剪切染色质 点击次数：4379　发布日期：2019-6-11　 来源：Aoran 染色质通常…

​SONICS超声波细胞破碎仪维修保养及使用注意 ​SONICS超声波细胞破碎仪维修保养及使用注意 SONICS超声…

   一、鹿茸多肽简介     据我国《本草纲目》中记载：鹿茸具有补肾、强筋健骨、生精益血等功效。鹿茸是一种特殊的软骨组织，含有多种活性因子。现代医学表明，鹿茸的化学成分较为复杂、其中含有大量的氨基酸、多肽、蛋白质、无机元素等成分，而蛋白质成分高达55.26%，更加证明鹿茸多肽是其主要的生物活性成分物质。

超声波是一种频率高于20000赫兹的声波，它的方向性好，穿透能力强，易于获得较集中的声能，在水中传播距离远，可用于测距、测速、清洗、焊接、碎石、杀菌消毒等。在医学、军事、工业、农业上有很多的应用。

由比利时 Diagenode 公司开发生产的 Bioruptor 非接触式全自动超声破碎仪可获得传统超声方法无可比拟的质量、效率和安全性。这一创新已在欧美广泛应用，被上百篇权威杂志引用，目前最畅销的有两款，Bioruptor Plus和Bioruptor Pico。Bioruptor Plus通用性更广泛，Bioruptor Pico更专注于处理微小量样品，主要用于ChIP实验和二代测序的前处理， Bioruptor 超声破碎仪逐渐成为 ChIP (染色质免疫共沉淀) 研究平台不可缺少的标准化工具。

超声波粉碎机是利用超声波在液体中的分散效应,使液体产生空化的作用,从而使液体中的固体颗粒或细胞组织破碎。

超声波细胞破碎仪使用注意事项：

1 、切记空载（一定要将超声变幅杆插入样品后才能开机,）
2、变幅杆（超声探头）入水深度： 1.5Cm 左右，液面高度最好有30mm以上，探头要居中，不要贴壁。超声波是垂直纵波，插入太深不容易形成对流，影响破碎效率。
3、超声参数设置：设置键好仪器工作参数（具体设置见说明书或来电咨询），对于对温度要求比较敏感的样品（比如细菌）一般外面采用冰浴，实际温度肯定是低于25度，蛋白核酸肯定不会变性。
1）  时间：超声时间每次最好不要超过5秒 ，间隙时间应大于或等于超声时间，以便于热量散发。时间设定应以超声时间短，超声次数多原则，可延长超声机子以及探头的寿命。
2）  超声功率： 不宜太大，以免样品飞溅或起泡沫，如小于10ml样品容量，功率应在200w以内,选用2mm超声探头，另将面板后面的变幅杆选择开关打到相应挡；10-200ml样品容量的功率在200－400w，选用6mm超声探头，另将面板后面的变幅杆打到相应挡；200ml以上的样品容量功率在300-600w之间，选用10mm超声探头，另将面板后面的变幅杆打到相应挡；（2MM的小探头功率严禁超过350W）
3）  容器选择：有多少的样品就选多大的烧杯，这样也是有利样品在超声中对流，提高破碎效率。例如；20ML的处理量最好用20ML的烧杯。
如100ml大肠杆菌样品设置参数： 超声5秒 ／间隙5秒 次数70次（总时间为10分钟）。功率300W（仅供参考）
500ML左右的量，功率开到500W-800W左右
4、若样品放在1.5ml的EP管里请一定要将EP管固定好，以防冰浴融化后液面下降导致空载
5、日常保养：用完后用酒精擦洗探头或用清水进行超声！
超声波细胞粉碎机